二手液相色譜儀的原理是利用不同待分離物質在兩相中的親和力差異，如分配系數、吸附容量等。利用外力，含有樣品的流動相(氣體、液體)通過固定在柱或平板上的固定相表面，該固定相與流動不相溶。當流動相中攜帶的混合物流經固定相時，混合物中的組分與固定相相互作用。

　　為了保證液相色譜儀使用的穩定性，我們對于設備使用環境是有一定要求的，包括：通風、照明、供電、環境溫度和濕度以及潔凈度，其中：

　　1、通風：使用液相色譜儀分析過程中，由于流動相中含有揮發性有機溶劑（甲醇、乙睛等）會產生有害氣體，對儀器中的光學元件帶來腐蝕，應注意儀器室的通風，以排除室內有害氣體、保持空氣清新。通風主要有兩種方式：一種自然通風，定時打開門窗，讓內外空氣對流;另一種是強制通風，如用通風柜、排風扇等，及時將有害氣體排出室外。

　　2、照明：室內照明要光線適中，避免陽光直射。為避開直射光線對儀器操作、觀測的影響，儀器(顯示屏)應側向光線。實驗室窗戶要掛窗簾，以便隨時調節光照強度。

　　3、供電：液相色譜室應設有照明電源和動力電源，動力電可供儀器運行使用。為減少噪音的干擾，儀器應遠離瞬時供電的大功率電器設備，如大型電動設備、電梯、空調系統等。為保證HPLC輸液泵的精度，必須要保證穩定的輸人電壓，為此，建議色譜室應設有和儀器負荷相當的穩壓電源。

　　4、環境溫度和濕度：適宜的溫度和濕度是保障HPLC儀正常運行、性能穩定的必要條件。一般要求室溫在20一30℃之間，日溫度變化2一3℃，不要波動太大，否則，在開機分析時會影響色譜分離，夏季一定要控制室溫不要超過30℃，溫度太高會使流路系統產生氣泡，影響檢測器的正常工作（如熒光檢測器）。室內相對濕度應控制在60%以下。

　　5、潔凈度：懸浮于空氣中的顆粒物質會對色譜儀器分析帶來干擾，使本底和噪聲升高，成為分析測試的污染源，直接影響高純物質的純度與痕量雜質的分析。